| 日前，一項(xiàng)國(guó)家自然科學(xué)基金資助項(xiàng)目——構(gòu)建以胃癌MG7-Ag模擬表位為基礎(chǔ)的DNA疫苗，在第四軍醫(yī)大學(xué)西京醫(yī)院全軍消化病研究所完成。這項(xiàng)研究成果為胃癌的免疫治療提供了一條新途徑。
近年來(lái)，腫瘤疫苗的研究已成為腫瘤
免疫治療研究的熱點(diǎn)領(lǐng)域。將編碼腫瘤抗原的基因克隆入真核表達(dá)載體構(gòu)建的DNA疫苗具有容易大量制備、誘導(dǎo)免疫反應(yīng)廣譜、高效、持久等優(yōu)點(diǎn)，已得到廣泛研究和應(yīng)用。而胃癌作為消化系統(tǒng)常見(jiàn)的惡性腫瘤，由于缺少特異性抗原，目前尚未研究出一種有效的疫苗。胃癌MG7-Ag是西京醫(yī)院全軍消化病研究所發(fā)現(xiàn)的一種特異性較好的胃癌標(biāo)記物，并已初步證實(shí)可以誘導(dǎo)抗腫瘤免疫。
為構(gòu)建以胃癌MG7-Ag模擬表位為基礎(chǔ)的DNA疫苗，該所研究人員將HindⅢ酶切位點(diǎn)、MG7-Ag模擬表位和通用性輔助性T細(xì)胞(Th細(xì)胞)位編碼序列的反向互補(bǔ)序列順次設(shè)計(jì)于下游引物中，通過(guò)兩次聚合酶鏈?zhǔn)椒磻?yīng)將兩種表位連接于一段載體基因，HindⅢ酶切位點(diǎn)位于載體片段與表位基因之間，將目的基因插入pUCm-T載體。酶切鑒定和序列測(cè)定證實(shí)后，利用pUCm-T載體和pcDNA3.1(+)載體共有的Kpn1和Xba1酶切位點(diǎn)，將目的基因亞克隆入真核表達(dá)載體pcDNA3.1(+)載體。酶切鑒定后，利用目的基因和pcDNA3.1(+)載體上的HindⅢ酶切位點(diǎn)，HindⅢ酶切除去載體基因片段，得到胃癌MG7-Ag模擬表位和通用性Th細(xì)胞表位的真核表達(dá)載體。結(jié)果經(jīng)序列測(cè)定證實(shí)：PCR產(chǎn)物為載體基因、HindⅢ酶切位點(diǎn)、MG7-Ag模擬表位及通用性Th細(xì)胞表位的融合片段，最終得到的重組pcDNA3.1(+)質(zhì)粒含有正確編碼的以上兩種表位的基因片段。他們將MG7-Ag模擬表位和一種通用性Th細(xì)胞表位PADRE的基因克隆入pcDNA3.1(+)真核表達(dá)載體，構(gòu)建了以胃癌MG7-Ag模擬表位為基礎(chǔ)的胃癌DNA疫苗。
據(jù)該所研究人員介紹，他們希望能利用PADRE高效輔助作用的DNA疫苗制備容易，誘導(dǎo)免疫持久、廣譜的特點(diǎn)，研制出一種新型的胃癌疫苗應(yīng)用于胃癌免疫治療 |
